实验原理及意义
淋巴细胞永生化是指通过特定技术手段（EB病毒转化）使淋巴细胞获得无限增殖能力的过程，主要应用于B淋巴细胞。
这一技术在生物医学研究中具有重要意义：
1. 提供持续稳定的研究材料
建立的淋巴母细胞系（LCLs）可以无限增殖，提供了充足的细胞来源，解决了原代淋巴细胞存活时间短、难以长期维持的瓶颈问题，使长期、可重复的实验研究成为可能。
2. 保留原始基因组信息
永生化细胞系完整保留了供体的遗传背景，包括特定的基因突变和免疫特征。这对于研究遗传性疾病、个体化医疗和罕见病机制至关重要。
实验流程
(一)实验样本：患者外周血（PBMC）
(二)实验内容：
01人外周血淋巴细胞分离
02EB病毒液制备
03淋巴细胞永生化诱导，并扩大培养保种冻存
04永生化细胞系相关鉴定
实验结果
(1)细胞培养
诱导淋巴细胞永生化，诱导成功后细胞获得传代能力，显微镜下观察，细胞出现聚团现象。
(2)支原体检测
使用支原体检测试剂盒（CELLCOOK:MT01A）检测永生化样本中支原体情况，PCR扩增后电泳结果显示：验证样本无支原体污染。
(3)鉴定基因型
选择特定STR基因座进行Sanger测序验证，在基因座重复序列上下游设计引物，使用血样样本以及永生化后的淋巴细胞样本提取gDNA，进行扩增，扩增产物纯化后进行sanger测序。测序结果显示，永生化淋巴细胞样本和血液样本测序结果一致，与STR鉴定位点的重复序列个数也一致。
(4)连续传代扩培
体外连续传代培养，继续观察细胞生长状态并进行细胞冻存保种。
实验结论
通过EB病毒成功诱导外周血淋巴细胞永生化，淋巴细胞获得持续传代能力。
上文为年前刚交付的细胞永生化案例
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